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2020年8月8日，由中華醫(yī)學(xué)會北京分會、北京醫(yī)學(xué)會婦產(chǎn)科分會主辦的“2020北京地區(qū)婦產(chǎn)科專業(yè)學(xué)術(shù)年會”在京隆重召開！此次學(xué)術(shù)年會上，來自美國MD Anderson癌癥中心的Simrit Parmar教授作了題為“The New Application of Cord Blood (臍帶血的新應(yīng)用)”的講座。Parmar教授借此次會議的機會，向線上及線下的參會者介紹了臍帶血中的調(diào)節(jié)性T細胞（T-reg細胞）在治療骨髓衰竭疾病，以及全球突發(fā)的COVID-19新冠肺炎引發(fā)的急性呼吸窘迫綜合征（ARDS）的研究結(jié)果：

• 一項臍帶血來源T-reg細胞針對于骨髓衰竭的I期試驗結(jié)果顯示，入組的6位患者在接受第一次輸注后，均沒有出現(xiàn)不良反應(yīng)，各位患者都顯示出了一定的臨床療效。

• 臍帶血來源T-reg細胞在治療4例COVID-19新冠肺炎ARDS患者后，患者的疾病狀態(tài)都得到了顯著改善。基于以上數(shù)據(jù)，一項名為RESOLVE（即調(diào)節(jié)性T細胞輸注治療新冠肺炎肺損傷）的隨機安慰對照試驗已經(jīng)啟動。

臍帶血來源的調(diào)節(jié)性T細胞（T-reg）由于來自于臍帶血，具有與成人T-reg細胞不同的特性，它可以通過靜脈輸注進行治療，它們是同質(zhì)的，且是非常成熟的細胞。同時它們可像藥物療法一樣，進行多次使用來控制炎癥的進展，所以臍帶血來源T-reg細胞未來在血液系統(tǒng)、肺部疾病、癌癥、神經(jīng)系統(tǒng)疾病方面有著很好的臨床應(yīng)用前景。

以下為此次講座的內(nèi)容：

眾所周知，正是臍帶把胎盤和嬰兒連在一起，其中臍帶血有著特別有活力的多種細胞，更重要的是，含有豐富的原始造血干細胞。

這個插圖展示了臍帶血的處理、收集和儲存是如何進行的，從臍帶血的分離、紅細胞沉淀、然后離心，最后再放置到液氮中長期儲存。臍帶血由此發(fā)展成為可用于多種再生醫(yī)學(xué)目的的細胞資源。儲存在臍帶血庫的臍帶血優(yōu)勢包括：

第一，它們不會受到任何感染；

第二，由于長期低溫液氮保存，它們可以長期保存而不喪失基本特性；

第三，病毒感染及細胞突變的風(fēng)險很低；

第四，它是產(chǎn)后采集，安全無痛苦，對母嬰沒有傷害；

最后，這些細胞有一種非常特殊的免疫豁免特性，這些細胞能夠干擾免疫系統(tǒng)，從而在治療應(yīng)用方面發(fā)揮作用。

那么臍帶血的新應(yīng)用是什么呢？臍帶血的傳統(tǒng)應(yīng)用是造血干細胞移植治療一些血液類疾病。在新的治療方法中，有很多新的令人振奮的研究。特別是Parmar教授所在機構(gòu)的一些研究，比如說對臍帶血中自然殺傷細胞的研究，同時還有臍帶血間充質(zhì)干細胞療法，美國杜克大學(xué)的庫茨伯格教授已有自體臍帶血在神經(jīng)系統(tǒng)疾病中的應(yīng)用進展，今天重點介紹的是Parmar教授實驗室目前研究的，關(guān)于調(diào)節(jié)性T細胞（T-reg）的療法。

什么是調(diào)節(jié)性T細胞（T-reg細胞）？我們每個人都有調(diào)節(jié)性T細胞，它們實際上負責(zé)保護我們的身體，保護我們免受自身細胞對自身抗原的攻擊，從而保護我們免受自身免疫疾病的侵襲。如果調(diào)節(jié)性T細胞嚴(yán)重缺乏會導(dǎo)致致命的后果，如產(chǎn)生IPEX綜合征。也有許多其他的自身免疫疾病的發(fā)生也是由T-reg細胞的缺乏引起的。

在介紹臍帶血來源調(diào)節(jié)性T細胞的應(yīng)用前，Parmar教授先介紹了以上的圖示。圖中紅線表示未解決不可控的炎癥，藍線表示自然消炎的過程，由于適應(yīng)性免疫失敗而導(dǎo)致的持續(xù)炎癥，最終導(dǎo)致了不同類型的炎癥性疾病，自身免疫性疾病以及產(chǎn)生腫瘤微環(huán)境。Parmar教授假設(shè)慢性炎癥可以導(dǎo)致不同類型的慢性疾病，包括她嘗試治療的骨髓衰竭。在她的實驗室里，當(dāng)誘導(dǎo)骨髓再生障礙后，在加入臍帶血來源的T-reg細胞后，這種情況會發(fā)生逆轉(zhuǎn)。由此推測，如果將臍帶血應(yīng)用于患有骨髓衰竭綜合征的病人，就有可能扭轉(zhuǎn)這種缺陷。

Parmar教授介紹到目前正在進行的一項臍帶血治療骨髓衰竭疾病的Ⅰ期試驗。實驗中設(shè)計了三種不同的細胞劑量水平，所用的是新鮮細胞，HLA配型的六個位點中至少三個位點相合。治療中沒有進行淋巴細胞清除或者免疫抑制，這些細胞是通過門診就可以給到病人的。她同時向大家介紹了試驗進行的方式，即符合條件的病人先通過抽血檢測其HLA分型，然后把符合條件的病人的HLA分型告知合作方，合作方選擇合適的臍帶血單位并相應(yīng)生產(chǎn)出臍帶血來源T-reg細胞制劑。經(jīng)過兩到三周后送給病人進行輸注治療。實驗中一份臍帶血對應(yīng)生產(chǎn)出一份T-reg細胞制劑。這個試驗的結(jié)果數(shù)據(jù)顯示，在第一次輸注后，幾乎所有的病人都顯示出了一些臨床療效。

從今年初COVID-19新冠肺炎爆發(fā)并持續(xù)在全球肆虐，目前有很多數(shù)據(jù)來自中國，現(xiàn)在其他國家也逐步有越來越多的數(shù)據(jù)。這種疾病最致命的并發(fā)癥是急性呼吸窘迫綜合征（ARDS），這個并發(fā)癥是由炎癥細胞因子風(fēng)暴導(dǎo)致并延續(xù)的。Parmar教授介紹到，有很多數(shù)據(jù)報告顯示T-reg細胞在有ARDS的新冠肺炎患者中是減少的，并且這一功能紊亂與病人的癥狀嚴(yán)重程度相關(guān)聯(lián)。所以當(dāng)全世界都在研究疫苗的時候，她和團隊嘗試用抗炎性細胞進行治療，嘗試使用這些抗炎類細胞來阻止細胞因子風(fēng)暴。

這些圖片展示了COVID-19患者的疾病進展情況，顯示了肺部炎癥的進展情況。即使病毒載量很低而無法檢測出來，但是一旦細胞因子風(fēng)暴開始，就很難被控制，最終引發(fā)多個器官的衰竭。

在Parmar教授的實驗室里，通過試驗?zāi)Ｐ蜕闪艘恍?shù)據(jù)。在這個模型中通過放療、細胞療法去治療肺部損傷。當(dāng)給肺部加入T-reg細胞時，可以防止肺部發(fā)生出血、上皮損傷以及炎癥，從而保證了肺部的完整性，進而提高了生存。

Parmar教授實驗室中的研究員Mi-Ae Lyu博士專注于研究T-reg細胞在肺部的歸巢。她經(jīng)過GFP標(biāo)記的T-reg細胞一旦注射進入老鼠體內(nèi)后發(fā)現(xiàn)，這些細胞首先進入肺部（因為這是所有細胞第一次通過的地方），即使它們被分布到骨髓和腸道，到了第10天肺組織仍有大量的細胞吸收。隨后Mi-Ae嘗試多次注射T-reg細胞，這些細胞表達很多肺組織的歸巢標(biāo)記物，包括CD49d。由此可以看到T-reg細胞在肺部的濃度比其他組織的都要高。

在做組織病理切片時，可以看到有黑色和深色染區(qū)的區(qū)域，這些是CD8+標(biāo)記的T細胞聚集的部位。但當(dāng)用已經(jīng)處理為肺病的老鼠進行臍帶血治療時，每周給它們注射T-reg細胞，可以解決長期的肺部炎癥。基于這個假設(shè)，如果T-reg細胞能夠減少骨髓中的炎癥，并且經(jīng)過處理后能夠向肺部移動，應(yīng)該也可以減少肺部炎癥。

Parmar教授最近發(fā)表的論文介紹了這項研究，在這次COVID-19疫情期間，他們治療了兩個病人。第一位患者是患有自閉癥的69歲養(yǎng)老院男性，他被送到醫(yī)院時，多器官已發(fā)生衰竭，西魯單抗與羥基氯喹治療無效，因為他有腎損傷不能做透析而采用CVVH靜脈血液過濾。從他入院2天后開始上呼吸機，后進行了臍帶血來源T-reg細胞輸注，病人完全脫離了重癥。他的氧合功能改善了，整體情況明顯好轉(zhuǎn)。在治療的10天后，病人已經(jīng)拔掉了插管。

進一步分析可以看到患者的臨床改善與炎癥標(biāo)志物的程度有著相關(guān)性?；颊叩难装Y標(biāo)記物CRP逐步降低；鐵蛋白半衰期較長，也逐步降低；肝臟中的谷草轉(zhuǎn)氨酶（AST）降低，IL-6也從23000一直減少到了4000，在四個小時內(nèi)看到非常顯著的改善，實際上是病人淋巴細胞計數(shù)的改善。病人的淋巴細胞數(shù)最初在200左右，經(jīng)過第一次輸注后略有上升，經(jīng)過第二次注射后，一直上升到2000，并且和整個身體改善的狀態(tài)相關(guān)。在統(tǒng)計了所有相關(guān)的指標(biāo)后，可以看到所有指標(biāo)都是降低趨勢，并且隨著每次臍帶血來源T-reg輸注后都進一步降低。

第二位病人很年輕，但病情卻更重，他已經(jīng)用上了ECMO體外心肺機，病人入院后咳嗽、呼吸困難，卡魯單治療失敗，伴有多器官衰竭，他進行了三次臍帶血T-reg細胞制劑的輸注治療。到了第22天，也拔掉插管了。

同樣的可以看到該患者的炎癥標(biāo)志物也都得到了顯著改善。IL-6從峰值2萬多顯著降低；鐵蛋白和CRP數(shù)值也顯著下降。但同樣他的淋巴細胞計數(shù)也提高了。據(jù)約翰霍普金斯的研究者發(fā)現(xiàn)，該患者的CD4+及CD8+淋巴細胞都有所增加，說明不光是T-reg細胞有所增加，其實促進了所有造血系統(tǒng)的細胞成分的分化。這個案例同樣體現(xiàn)了各個炎癥標(biāo)志物的降低效果，在進行三次T-reg細胞制劑輸注以后，體內(nèi)的IL-6、IL-12等標(biāo)志物的數(shù)字明顯降低，除了MCP-1外其他所有物質(zhì)的含量值都在下降。

此后Parmar教授的團隊又陸續(xù)治療了2位病人，一位逐步退燒病情得到好轉(zhuǎn)；另一位已經(jīng)上了ECMO，同樣也在24小時內(nèi)病情明顯好轉(zhuǎn)，外部供氧比也從100%降到了60%，正逐步好轉(zhuǎn)?；谶@些令人鼓舞的數(shù)據(jù)，一項名為RESOLVE的試驗已經(jīng)啟動了，即調(diào)節(jié)性T細胞輸注治療新冠肺炎肺損傷試驗。

Parmar教授指出，為每一個病人單獨制備細胞是不現(xiàn)實的，進入病人體內(nèi)的細胞需要被大規(guī)模制備?，F(xiàn)在每采集一份臍帶血，一般產(chǎn)生一個臍帶血單位，他們能夠從中分離出調(diào)節(jié)性T細胞并產(chǎn)生數(shù)百份制劑，然后進行冷凍保存。這些制劑可以在液氮中長時間存活，并可在數(shù)小時內(nèi)按需運送給病人，可以直接給病人進行輸注。對于細胞治療中如何根據(jù)需要制作細胞制劑的問題來說，她認(rèn)為這是一項重大突破。因為T-reg細胞是從臍帶血中分離出來的，有著巨大的優(yōu)勢。不必依賴于成年人捐獻，患者也不需要依賴自己。臍帶血可以給細胞治療提供很多種可能性。

她也介紹到RESOLVE試驗是一個隨即安慰對照試驗，如果成功的話，這將是第一個臍帶血T-reg細胞治療新冠肺炎ARDS的試驗，可以用于注冊和上市審批。這個多中心的試驗將在美國各地多個醫(yī)院開展。

最后，有人可能會問臍帶血T-reg療效很好，但同時也有至少上百個關(guān)于間充質(zhì)干細胞的試驗正在進行（這一現(xiàn)象的原因是什么呢？）。Parmar教授指出她對T-reg細胞有非常深入的研究，認(rèn)為間充質(zhì)干細胞不能勝任治療ARDS的工作。因為至少有兩項隨機研究表明，間充質(zhì)干細胞并不能改善ARDS。特別是，對于那些使用ECMO的患者來說，間充質(zhì)干細胞治療更復(fù)雜。對比之下，她建議使用臍帶血調(diào)節(jié)性T細胞，因為這些臍帶血T-reg細胞可以通過靜脈輸注進行治療，它們是同質(zhì)的，且是非常成熟的細胞，就像藥物療法一樣，可以多次使用來控制炎癥的進展。

北京大學(xué)人民醫(yī)院王建六教授點評

Simrit Parmar教授講到了關(guān)于臍帶血T-reg細胞應(yīng)用于現(xiàn)在的新冠肺炎重度ARDS治療，總共進行了4例治療，她詳細介紹了2例患者治療經(jīng)驗，取得了非常好的效果。正如 Parmar 教授所說，臍血里面的細胞成分是非常好的資源，我們要把它用好。實際上過去利用臍帶血干細胞做骨髓移植，現(xiàn)在用臍帶血里面的自然殺傷細胞、淋巴細胞等治療一些疾病，探索自閉癥、腦癱以及新冠肺炎治療，都是一些非常好的探索。

臍帶血作為珍貴的生命寶庫，近年來在醫(yī)療科技水平的不斷提高和諸多科研人員的努力下，它的珍貴價值被越來越多的開發(fā)出來，臍帶血其中富含的多種類的干細胞資源也發(fā)揮出了越來越重要的作用。臍帶血采集方便、對孕嬰無傷害、實物儲存應(yīng)用及時，移植后排異率低且程度較輕，自體儲存的臍帶血一旦需要使用時，不需配型，細胞活性強，無免疫排斥的危險，醫(yī)療費用低，具有非常大優(yōu)勢。隨著人類對干細胞研究的不斷深入，我們相信臍帶血在未來的臨床應(yīng)用的價值會更加重要，會為更多的病患帶去治療的福音。

文章部分內(nèi)容來源于婦產(chǎn)科在線